Ионно-парная хроматография

Mar 13, 2023

Заполните форму ниже, и мы вышлем вам по электронной почте PDF-версию книги «Ионно-парная хроматография – как работает IPC, сильные стороны, ограничения и применение».

Заполните форму ниже, чтобы разблокировать доступ ко ВСЕМ аудиостатьям.

Хроматография заряженных аналитов часто является сложной задачей, поскольку они не удерживаются эффективно на обычно используемых колонках с обращенной фазой и элюируются в мертвом объеме. На колонках с полярными или водными неподвижными фазами форма пиков может быть плохой из-за чрезмерного удерживания. Ионообменные колонки, в которых для разделения противоположно заряженных ионов используются заряженные неподвижные фазы, дороги, подходят для небольшого диапазона аналитов и имеют ограниченную эффективность разделения. Ионно-парная хроматография (ИПХ) является подходящей альтернативой хроматографии полярных или ионных частиц.

Что такое ионно-парная хроматография?

Чем ионно-парная обращенно-фазовая хроматография отличается от других видов ионной хроматографии?

- Механизм удержания

- Факторы, влияющие на удержание

- Роль эффекта ионной пары

- Экологический анализ

- Фармацевтический и пищевой анализ

- Биологический анализ

- Анализ металлов

Заключение

IPC — это тип ионной хроматографии, который используется для разделения гидрофильных или заряженных аналитов на колонках с использованием обращенно-фазовых или «нейтральных» неподвижных фаз, не несущих заряда. Он включает в себя изменение полярности заряженных аналитов посредством их взаимодействия с ионным реагентом, который добавляется к подвижной фазе. Эти молекулы реагентов несут заряды, противоположные зарядам ионов аналита, с которыми они способны образовывать электростатические связи. Пары, образующиеся между аналитами и ионами реагентов, ведут себя как нейтральные гидрофобные фрагменты, которые можно разделить на колонках C18 или C8. IPC используется для разделения полярных органических кислот, оснований и цвиттер-ионов, а также неорганических ионов.

Реагенты для спаривания ионов также известны как добавки для спаривания ионов или гетероны. Поскольку эти молекулы имеют полярную головную группу и гидрофобные углеводородные цепи, они напоминают мыло (рис. 1). Следовательно, этот метод был назван «мыльной хроматографией», когда он был представлен Йораном Шиллом в 1973 году.1,2 Его также называют хроматографией ионного взаимодействия, поскольку ион-реагент взаимодействует с неподвижной фазой, регулируя удержание ионов, присутствующих в образце. .

Ионная хроматография (ИК) в широком смысле относится к разделению ионов и включает три различных механизма, а именно: ионный обмен, исключение ионов и спаривание ионов. Когда разделение происходит в результате конкурентного взаимодействия между ионами аналита и ионами элюента для противоположно заряженных участков неподвижной фазы (рис. 2), тип хроматографии называется ионообменной хроматографией (IEX).

Смесь недиссоциированных, частично диссоциированных и полностью диссоциированных аналитов можно разделить с помощью ионно-эксклюзионной хроматографии (ИЭК), в которой также используются заряженные неподвижные фазы (рис. 3). Подвижная фаза накапливается на поверхности и внутри пор неподвижной фазы, что приводит к образованию «окклюдированной фазы». Нейтральные аналиты прочно удерживаются в окклюдированной фазе и элюируются из колонки последними. Частично диссоциированные аналиты, которые имеют несколько меньшее взаимодействие с адсорбированной подвижной фазой, элюируются раньше. Полностью диссоциированные и заряженные аналиты, которые отталкиваются одинаково заряженными ионами неподвижной фазы, «мембраны Доннана», элюируются первыми, причем целиком в пустом объеме колонки.

Ионно-парная обращенно-фазовая хроматография проводится на неполярных «обратно-фазовых» колонках путем добавления к подвижной фазе реагентов для спаривания ионов. Например, трифторуксусная кислота используется для спаривания с положительно заряженными пептидами, а триалкиламины используются для спаривания ионов с анионами, такими как карбоксилаты или олигонуклеотиды.

Ионная хроматография подвижной фазы (MPIC) — это термин, часто используемый в контексте разделения небольших неорганических ионов методом IPC с последующим их обнаружением путем измерения подавленной проводимости. Этот метод подходит для анализа молекул с локализованными зарядами.