banner
Дом / Новости / Качественный иммуноанализ для определения остатков тетрациклинового антибиотика в образцах молока с последующей количественной улучшенной ВЭЖХ.
Новости

Качественный иммуноанализ для определения остатков тетрациклинового антибиотика в образцах молока с последующей количественной улучшенной ВЭЖХ.

Jun 19, 2023Jun 19, 2023

Том 12 научных отчетов, номер статьи: 14502 (2022 г.) Цитировать эту статью

1502 Доступа

2 цитаты

1 Альтметрика

Подробности о метриках

Загрязнение окружающей среды является одной из нескольких проблем, наносящих вред людям и дикой природе. Примером новых новых загрязнителей являются остатки антибиотиков, которые могут присутствовать в воде и продуктах питания. Хотя антибиотики предназначены для лечения или профилактики инфекций человека и животных, антибиотики также используются в качестве пищевых добавок для животных из-за их способности стимулировать рост и эффективность корма. Чрезмерное использование антибактериальных средств привело к накоплению остатков антибиотиков в пищевых продуктах, которые в конечном итоге потребляются человеком. Постоянное ненужное воздействие на человека антибиотиков через продукты животного происхождения или молоко, а также косвенно через растения или почву может увеличить вероятность появления бактерий с множественной лекарственной устойчивостью и, как следствие, отрицательно повлиять на здоровье человека. Введены новые правила использования антибиотиков. Из-за нехватки данных о состоянии остатков антибиотиков в различных видах пищевых продуктов, предназначенных для потребления человеком в Саудовской Аравии, в этом исследовании был предложен оптимизированный хроматографический метод (ВЭЖХ-DAD) с последующим подходом иммуноанализа для специфического обнаружения антибиотиков тетрациклинового ряда в образцах молока животных. Метод осуществляли на колонке RP-C18 с подвижной фазой, состоящей из 0,01 М KH2PO4:ацетонитрил:метанол (70:20:10, по объему/объему), доведенной до pH 4. Наблюдались улучшения в методе по показателям разрешения и чувствительности. Метод осаждения белка, использованный для экстракции, продемонстрировал высокий процент извлечения - 85–101%. Метод был валидирован в соответствии с рекомендациями Международной конференции по гармонизации (ICH). Из этих результатов очевидно, что присутствие остатков тетрациклиновых и окситетрациклиновых антибиотиков в молочных продуктах с рынка Саудовской Аравии ниже максимально остаточных пределов (MRL).

Загрязнение окружающей среды является проблемой, с которой мир сталкивается в нынешнем столетии. Эта проблема определяется как «загрязнение физических и биологических компонентов системы Земля/атмосфера до такой степени, что это отрицательно влияет на нормальные экологические процессы»1. Вещества или энергия, содержание которых превышает естественный уровень, считаются загрязнителями1. Остатки антибиотиков представляют собой одну из форм загрязнителей окружающей среды, которые могут присутствовать в животных, растениях или почве и способствовать развитию устойчивости микроорганизмов. Устойчивость микроорганизмов, возникающая в результате ненужного применения и воздействия антибиотиков, определяется как изменения в механизмах бактериальной резистентности или развитие новых механизмов в ответ на определенные антибиотики, классы антибиотиков или несколько типов антибиотиков на так называемые патогены с множественной лекарственной устойчивостью. МЛУ)2. В попытке сохранить противомикробную активность регулирующие органы ограничили процесс назначения антибиотиков. Однако антибиотики также используются в качестве консервантов пищевых продуктов, чтобы стимулировать рост и повысить продуктивность крупного рогатого скота и птицы, помимо их использования в ветеринарной медицине3,4,5. Предыдущие исследования показали, что использование высоких доз антибиотиков для повышения продуктивности животных связано с наличием остатков антибиотиков в продуктах животного происхождения6,7,8. Постоянное воздействие остатков антибиотиков на человека может быть вредным для человека, увеличивая вероятность развития аллергических реакций, нарушения нормальной кишечной флоры или может привести к передаче устойчивых к антибиотикам бактерий (ARB) или генов устойчивости к антибиотикам (ARG) от животных к человеку5.

Тетрациклин (TTR), хлортетрациклин (CTC) и окситетрациклин (OXY) являются одними из наиболее часто используемых антибиотиков в животноводстве из-за их эффективности и низкой стоимости9,10. Многие исследования продемонстрировали ненадлежащее использование этих антибиотиков во всем мире и последствия такой практики6,11. Например, имеет место бесконтрольное использование антибиотиков в комбикормах для животных или в качестве консервантов в пищевой промышленности12,13. Кроме того, антибиотики часто скармливают животным непосредственно перед убоем или вводят в сонную артерию сразу после убоя, чтобы увеличить срок хранения свежего мяса12. В конечном итоге остаточные концентрации антибиотиков могут превысить максимальные остаточные пределы (MRL), разрешенные Европейским Союзом (ЕС) и Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ).

 98.00%), chlortetracycline (> 95.00%) and the internal standard ornidazole (ORZ, > 99.00%) were purchased from Haoyuan ChemExpress Co., Ltd. (Shanghai, China). Potassium dihydrogen orthophosphate anhydrous (KH2PO4) was obtained from Loba Chemie Pvt. Ltd. (Mumbai, India). Ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt dihydrate (Na2EDTA) was obtained from Sigma–Aldrich Chemie Gmbh (Steinheim, Germany). Orthophosphoric acid (H3PO4) was obtained from Avonchem Ltd. (Cheshire, UK). The acetonitrile and methanol solvents in the mobile phase were of UHPLC and HPLC grade. Deionized water was used in all experiments. Milk samples were purchased from multiple local markets and farms in the city of Riyadh. Tetracycline Rapid Immunoassay test kits were obtained from Meizheng Biotech Group, a PerkinElmer company (Beijing, China). The HPLC system (Waters, Milford, MA, USA) consisted of a Waters 1525 binary HPLC pump, a Waters 2998 photodiode array detector, and a Waters 2707 autosampler. The data were acquired and processed using Waters Empower 3 software./p> 0.9998 for each drug, showing that the method is linear in the specified range. The concentrations used for the calibration curve were 0.09, 0.3, 0.5, 0.7, and 1 µg/mL./p>