banner
Дом / Блог / Ризобиальная миграция к корням, опосредованная FadL
Блог

Ризобиальная миграция к корням, опосредованная FadL

Nov 19, 2023Nov 19, 2023

Журнал ISME, том 17, страницы 417–431 (2023 г.) Процитировать эту статью

2136 Доступов

1 Цитаты

14 Альтметрика

Подробности о метриках

Миграция из ризосферы в ризоплану является ключевым процессом отбора в сборке корневого микробиома, но до конца не изучена. Члены Rhizobiales чрезмерно представлены в основном корневом микробиоме наземных растений, и здесь мы сообщаем о полногеномном транспозонном секвенировании генов приспособленности ризопланы полезных Sinorhizobium fredii на дикой сое, культивируемой сое, рисе и кукурузе. Было немного генов, участвующих в колонизации ризопланов широкого круга хозяев. Мутант fadL, лишенный переносчика жирных кислот, демонстрировал высокие скорости колонизации, в то время как мутации в exoFQP (кодирующих мембранные белки, управляющие полимеризацией и секрецией экзополисахаридов), но не мутации в экзогенах, необходимых для биосинтеза экзополисахаридов, приводили к серьезному нарушению скорости колонизации. Эта вариация не могла быть объяснена их выживаемостью в ризосфере и ризоплане и связанным с этим образованием биопленок и экзополисахаридов, но согласовывалась с их способностью к миграции в сторону ризопланы и связанной с ней поверхностной подвижностью и смесью AHL, чувствительных к кворуму (N-ацилированные-L-гомосериновые лактоны). . Данные генетики и физиологии позволяют предположить, что FadL опосредует поглощение длинноцепочечных АГЛ, в то время как ExoF опосредует секрецию короткоцепочечных АГЛ, что отрицательно влияет на биосинтез длинноцепочечных АГЛ. Мутанты fadL и exoF имели повышенные и истощенные внеклеточные длинноцепочечные AHL соответственно. Синтетическая смесь длинноцепочечных AHL, имитирующая смесь мутанта fadL, может улучшить подвижность поверхности ризобий. Когда эта смесь АГЛ была обнаружена в ризосфере, миграция к корням и колонизация ризопланы S. fredii усиливались диффузионным путем. Эта работа добавляет новые детали, управляющие внеклеточными АГЛ, которые модулируют миграцию бактерий к ризоплане. Система FadL-ExoFQP консервативна в Alphaproteobacteria и может формировать «домашнюю жизнь» различных ключевых ризобактерий.

Несмотря на постоянно расширяющийся каталог видов прокариот [1], лишь немногие таксоны широко распространены в почвах во всем мире [2]. Характеристики почвы играют более важную роль, чем генотипы растений, в определении состава корнеассоциированных бактериальных сообществ [3, 4]. В этом контексте многие исследования дополнительно выявили подмножество членов сообщества, которые воспроизводимо связаны с видами растений в различных географических точках и в разных условиях, таких как рис [5], цитрусовые [6], сахарный тростник [7] и разнообразные бобовые. виды [8]. Имеющиеся данные подтверждают создание многоэтапной модели сборки корневого микробиома, последовательно от основной массы почвы к ризосфере, ризоплане и эндосфере, в которой ризоплана является воротами отбора [5, 9]. Этот многоэтапный паттерн был подробно описан, но лежащие в его основе взаимодействия генов и окружающей среды, определяющие распределение и численность ризобактерий в различных нишах (основная часть почвы, ризосфера и ризоплана), остаются в значительной степени неизученными [10,11,12]. Этот пробел в знаниях препятствует окончательному эволюционному объяснению «домашней жизни» ризобактерий в этих экологических нишах [12].

Полногеномная идентификация генов приспособленности ризопланы модельных ризобактерий была значительно ускорена с помощью анализа Tn-seq в контролируемых условиях [13,14,15,16,17,18]. Однако функциональные характеристики этих генов приспособленности на разных этапах колонизации не рассматривались в этих высокопроизводительных исследованиях. Текущая модель многоступенчатой ​​колонизации включает хемотаксис по направлению к корням, прикрепление и последующее образование многоклеточной биопленки на ризоплане, что подтверждается совокупными данными обратной генетики различных ризобактерий [19]. Предполагается, что химические градиенты корневых экссудатов служат решающими условиями (например, сигнальной функцией) и ресурсами (питательной ценностью), которые дифференциально взаимодействуют с подвижными бактериями, формируя процесс миграции в сторону корневой ниши [20, 21]. Лиганды, непосредственно распознаваемые бактериальными хеморецепторами, по большей части неизвестны [22], хотя хемоэффекторная функция была предложена для органических кислот, углеводов, сахарных спиртов, аминокислот и растительных гормонов [23]. При прикреплении ризопланы, опосредованном разнообразными бактериальными адгезинами [24], подвижные бактерии постепенно переходят в сидячие формы, после чего происходит рост и созревание встроенных в матрикс бактериальных сообществ (экзополисахаридов (ЭПС), эДНК, эРНК, белков, липидов и других биомолекулы), т.е. многоклеточная биопленка [25]. Биопленка является «домом» для множества клеток одного и того же или разных видов, которые общаются друг с другом посредством высококонсервативных сигналов, чувствительных к кворуму, N-ацил-гомосерин-лактонов (AHL) [26]. Напротив, остается неясным, в какой степени зависящий от плотности процесс определения кворума участвует в миграции к корневой нише [19, 27, 28]. Это важно для понимания и разработки сборки корневого микробиома [29, 30].

 99%) of C8-HSL, 3-OXO-C8-HSL, C12-HSL, 3-OXO-C12-HSL, C14-HSL, 3-OXO-C14-HSL were purchased from Sigma (Darmstadt, Germany). The 1 µg/ml solutions were serially diluted to 1/4, 1/16, 1/256, and 1/1024. Mass spectrometric analyses were performed on a Q Exactive HF-X quadrupole trap mass spectrometry (Thermo Scientific, Waltham, MA. USA). Precursor ion-scanning experiments were performed in positive-ion mode to monitor for m/z 102./p> 0.05). The number of colony-forming units (CFUs) on rhizoplane showed a global host-dependent pattern (Fig. 5A), consistent with the variation in root exudates of different plants species [20] and their effects on root microbiome assembly [21]. Nevertheless, the opposite rhizoplane colonization ability between the fadL mutant and the exoF, exoP, and exoQ mutants was not host-dependent. Therefore, the following experiments on rhizosphere effects were only performed on one plant species (wild soybean)./p> 0.05). Regardless of survivability across these sites, the fadL and exoF mutants had higher (153–223% more CFUs than SF2; p values < 0.001; grey bars on the left panel of Fig. 6B) and lower (75–98% lesser CFUs than SF2; p values < 0.001; grey bars on the left panel of Fig. 6C) rhizoplane colonization rates, respectively, compared to SF2 (grey bars on the right panels of Fig. 6B, C). All rhizosphere phenotypes associated with these two mutants can be restored in their corresponding complementary mutant strains (Fig. 6D, E). These results are consistent with their contrasting surface motility ability (Fig. 4 and Fig. S5). Collectively, the variation in rhizoplane colonization ability among the fadL and exoF mutants, and SF2 is mainly modulated by their surface motility in the migration process from rhizosphere to rhizoplane./p> 0.05) when they were inoculated as a 1:1 mixture. In line with these rhizoplane colonization experiments, the sinI or traI sinI mutants showed impaired surface motility compared to SF2 and the traI mutant (Fig. S10B; p values < 0.001), but this surface motility defect can be recovered when they were mixed with SF2 (Fig. S10C). Therefore, the rhizoplane colonization defect of the sinI mutant was not as significant as that of the mutant lacking a multifunctional ExoF in an inoculant mixture containing the wild-type SF2./p>